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标题: 快速便捷的promega总DNA提取试剂盒
详细内容:

1  试剂盒组成:

 细胞裂解液,核酸裂解液,蛋白沉淀试剂,RNase溶液,DNA溶解试剂。

2  实验原理及流程:

(1)收集样品,加入细胞裂解液裂解红细胞,离心取上清;

(2)在上清液中加入核酸裂解液,裂解白细胞,离心取上清;

(3)上清中加入蛋白沉淀试剂,除去蛋白质;

(4)加入试剂沉淀出DNA后,用DNA溶解试剂重新溶解。

3  抽提不同材料的总DNA产量

物种和材料

样品起始量

DNA产量

RNase处理

人全血

 

补充:产量取决于全血中白细胞的数量

300μl

5-15μg

可选择

1.0ml

25-50μg

可选择

10.0ml

250-500μg

可选择

96孔板至少需20μl样品

50μl/孔

0.25-0.7μg

可选择

 

 

 

 

鼠全血

 

EDTA处理

300μl

6μg

可选择

肝素处理

300μl

6-7μg

可选择

96孔板

50μl/孔

0.2-0.7μg

可选择

 

 

 

 

细胞系

 

K562(人)

3 x106

15-30μg

必须

COS(非洲猴)

1.5 x106

10μg

必须

NIH3T3(老鼠)

2.25 x106

9.5-12.5μg

必须

PC12( 嗜铬细胞瘤

8.25 x106

6μg

必须

CHO(仓鼠)

1-2 x106

6-7μg

必须

 

 

 

 

动物组织

 

鼠肝脏

11mg

15-20μg

必须

鼠尾

0.5-1.0 cm鼠尾

10-30μg

可选择

 

 

 

 

昆虫

 

Sf9细胞

5 x106

16μg

必须

植物组织

 

 

必须

马铃薯叶片

40mg

7-12μg

必须

 

 

 

 

革兰氏阴性细菌

 

大肠杆菌JM109(过夜培养)

1ml

20μg

必须

5ml

75-100μg

必须

阴沟肠杆菌(过夜培养)

1ml

20μg

必须

5ml

75-100μg

必须

 

 

 

 

革兰氏阳性细菌

 

表皮葡萄球菌(过夜培养)

1ml

6-13μg

必须

 

 

 

 

酵母

 

啤酒酵母(过夜培养)

1ml

4.5-6.5μg

必须

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 
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