A. 试剂制备
1. 融化 BacTiter-Glo缓冲液，使用前在室温平衡。为方便起见，在使用前48小时融化BacTiter-Glo缓冲液并在室温保存。
2. 在使用前将冻干粉 BacTiter-Glo底物在室温平衡。
3. 将适当体积（目录号#G8230, G8231取 10ml, 目录号#G8232, G8233 取100ml）的 BacTiter-Glo缓冲液转移到装有BacTiter-Glo底物的安碚瓶中，溶解冻干粉状的酶/底物混合物。这就形成了BacTiter-Glo试剂。
4. 轻轻震荡混合，摇晃或上下颠倒小瓶使溶液均一。BacTiter-Glo底物应在1min内很容易地完全溶解。
5. 将试剂在室温平衡至少15分钟。
B. 从细菌中测量 ATP的操作过程指南
注意：所有步骤均在室温下（22C-25 C）完成。
1. 在一块孔壁不透明的多孔板上培养好微生物细胞（例如，100μl/孔在96孔板或25μl/孔在384孔板上）。
2. 准备只含培养基不含细胞的对照孔，以得到背景萤光值。
3. 将平板及其内容物平衡到室温。
4. 向每孔中加入与细胞培养基相等体积的 BacTiter-Glo试剂（如向96 孔板内含 100μl/孔的培养基中添加100μl 试剂，向384孔板内添加25μl 试剂）。
5. 在一个定轨振荡器上混合内容物，并孵育5分钟。
6. 记录萤光强度。
C. 做出 ATP标准曲线的方法（自选）
注意：所有步骤均在室温下（22-25C）完成。
1. 在培养基中配制 1μM ATP (100μl的 1μM ATP含10-10摩尔ATP)。
2. 在培养基中对ATP进行10 倍系列稀释（1μM 到10pM; 100μl体积将含有10-10到10-15摩尔的ATP）。
3. 在多孔板上 100μl 培养基内制备不同浓度的标准 ATP溶液。
4. 在每孔中加入与 ATP标准等体积的 BacTiter-Glo试剂（1：1 比例）。
5. 在定轨振荡器上简短混合内容物，孵育 1 分钟。由于不需要裂解释放 ATP, 所以
不需要长时间孵育。
6. 记录萤光值。
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