对于许多实验来说,确定蛋白样品浓度是至关重要的,打多数蛋白样品通过比色测定法定量。在典型的蛋白测定中,化学试剂加入到蛋白质样品溶液里产生颜色变化,这一变化可由分光光度计或酶标仪检测,并与以知浓度的蛋白标准曲线作比较。Bio-rad提供的4种蛋白测定手段,每种都有其对特的优点。如果样品数量多,所有4种测定都可以方便进行自动检测。
Quick Start Bradford 蛋白测定
Quick Start Bradford 蛋白测定是一种简单、精确的蛋白浓度定量方法。现成的1倍浓度染料试剂和7个预稀释浓度(0.125、0.25、0.5、 0.75、1.0、1.5、2.0 mg/ml)的2种蛋白标准品,使您拥有现成的检测工具。无需稀释标准品和染料试剂,一步完成蛋白浓度定量。
Quick Start Bradford 蛋白测定试剂盒含有小牛血清白蛋白或小牛gamma-球蛋白系列标准品。每个试剂盒中,每个浓度(0.125–2.0 mg/ml)的标准品均为2等份,装于螺纹管中,避免装于小玻璃中造成的浪费。 4°C 保存,一年保质期。同时提供5个2 mg/ml 等份的标准品,方便用户根据需要稀释。
除了标准品外,试剂盒还提供1× 染料试剂,用于进行1ml 和5ml标准测定、微孔板检测或微量检测。Quick Start Bradford蛋白测定试剂盒所含试剂可用于200个标准测试或4,000 个微孔板测试。
Bio-Rad 蛋白测定
Bio–Rad 蛋白测定是一种简单的、测定总蛋白浓度的比 色测定方法。该方法适应标准浓度测定、低浓度微量测定或96孔微孔板的快速测定。
Bio–Rad 蛋白测定方法的起源是Bradford染料结合方法(Bradford1976),该方法检测考马斯亮蓝G–250染料与蛋白 结合时(主要结合碱性或芳族氨基酸残基)的颜色变化。这种测定方法能定量多数蛋白或多肽(分子量>3,000–5,000)。许多去垢剂和碱性缓冲液会干扰测定。请 参考下表所列的不直接影响染料显色的化学试剂。由于不是每一个与蛋白结 合的试剂都经过测试,因此下表所列的有些试剂可能会影响某些蛋白的测定。
DC 蛋白测定
Bio-Rad的DC(去垢剂兼容) 蛋白测定是一种适用于去垢剂增溶蛋白样品的比色测定方法。该方法类似于常规的Lowry测定方法(Lowry et al.1951),但经过改良,节省了操作时间。DC蛋白测定只需要15分钟的温育过程,而且吸收值读数保持2小时的稳定。
RC DC 蛋白测定
RC DC蛋白测定是一种适用于含还原剂和去垢剂的蛋白样品比色测定方法。以 Lowry 方法(Lowry et al.1951)为基础的RC DC蛋白测定,具有原来DC蛋白测定的特点,并能与更多的试剂兼容,简化了复杂蛋白样品溶液的定量测定 |