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标题: Promega推出无需DNase处理的AAV基因组定量分析产品
详细内容:     腺相关病毒(AAV)是基因治疗递送中常用的载体。AAV基因治疗的主要挑战之一就是开发有效的质量控制和质保方案,因为准确量化和表征AAV生产批次对于临床剂量的精准把控至关重要。目前的方案,如DNase处理和哺乳动物感染性测定,通常不够完善,可能导致批次间的高度变异性,从而因功能基因剂量的不准确测定而导致实验结果不理想。 

    Promega最新开发的TruTiter™ Reagent System能够在无需进行DNase 处理的情况下,通过dPCR 或qPCR 技术对病毒基因组进行一致性定量分析。

    该产品可以应用于:

    AAV生产与工艺开发:在载体生产、纯化和质量控制(QC)的整个过程中实现精确的基因组滴定,以优化产量并确保批次一致性。

    基因治疗剂量确定:为临床前和临床研究提供准确的病毒基因组定量,支持监管合规性和治疗效果。

    AAV血清型和工程化衣壳的比较分析:有助于表征不同AAV衣壳的稳定性和完整性,特别是那些在DNase工作流程中容易破裂的工程变体。

    学术与转化研究:为研究AAV生物学、基因编辑和治疗性载体开发的研究人员提供快速、可靠的AAV定量。

    该产品特点:

    未包装DNA的选择性抑制:消除假阳性结果,确保仅对完整的AAV基因组进行计数。  

    无需DNase处理,简单的工作流程: 减少处理时间、酶的变异性以及工作流程的复杂性。

    与现有的PCR 病毒定量方案兼容可以使用多种qPCR或数字PCR平台进行直接扩增。

    直接从AAV样本中扩增:无需DNA纯化,节省时间并简化工作流程。

    对工程改造AAV衣壳更精确的滴度测量:解决了DNase工作流程中衣壳破裂的问题。

    经过验证的数据:与DNase-dPCR和感染性检测相比,性能相当或更优。  

    检测原理:TruTiter™ Reagent System采用一种新型分子(Viability PCR Reagent),该分子无法穿透细胞膜,能够与任何暴露在外的核酸结合,从而阻止下游的扩增反应。这一特性使得在AAV 基因组滴定过程中无需进行DNase 处理步骤。TruTiter™ Reagent与现有的PCR病毒定量方案兼容,可直接使用多种qPCR或数字PCR平台进行扩增。


 
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