The Chroma-GloTM Luciferase Assay System (Chroma-GloTM 萤光素酶检测系统)和Chroma-LucTM Vectors(a-d) 能用于在单 样品中加入单一试剂产生红色和绿色(dual-color,双色)萤光素酶。 Chroma-LucTM载体由6个质粒构成,含有合成的红色基因一个,以及 两个绿色的叩头虫萤光素酶基因中的一个基因;CBRluc含有发红光 的萤光素酶基因,而CBG68luc和CBG99luc含有发绿光的萤光素酶 基因。Chroma-LucTM萤光素酶产生的双色萤光用滤光法测量,既可 对每个报告蛋白单独测量,也可以几乎同时测量。除了他们的萤光 颜色不同之外,这三种Chroma-LucTM基因还有一下不同:CBG99luc 和CBRluc具有99%的DNA和98%的蛋白质相似性,是用于瞬时表达 检测的理想选择;CBG68luc和CBRluc具有68.9%的DNA相似性,然 而蛋白质相似性确很高(>98%),它们俩用于稳定表达检测是最好 的。这些基因中的每一个都具有基本载体构造如多克隆位点 (MCS),同时还有含SV40启动子和增强子的对照载体。Chroma- GloTM检测系统是一种均质检测,每一种Chroma-LucTM萤光素酶产生 的萤光的半衰期>30分钟,因此无需样品预处理就能对多个板进行操 作。从同一孔中进行两种报告基因检测,是高效、可重复的高通量 筛选方法。 |